化学実験　有機・生化系実験４

PCR (Polymerase Chain Reaction)法による遺伝子型の解析

配布した冊子体テキストより詳しく記述してあり、有用なリンクが張ってあります。

実験を行う前、レポートを書くときなど参考にしてください。

(このページはGoogle、Yahoo!等で「PCR　化学実験」で検索すると上位にヒットするはず)

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参考文献

1. 芦田嘉之著「やさしいバイオテクノロジー　カラー版」（サイエンスアイ新書）2007年、2010年、2011年、2015年
2. 芦田嘉之著「カラー図解でわかる高校生物超入門」（サイエンスアイ新書）2015年
3. Nakamura, K. et al., Biochemistry and Molecular Biology International, 31, 439–445 (1993)

　PCR primerの設計や制限酵素実験などはこの文献を参考にした。

4. ３年後期選択の講義「バイオインフォマティクス」

日　程 　2023年度

（火、水、木の5〜10時限、12:50-17:50）　10〜12人ずつ、年6回

07月18日、19日　　 07月25日、26日、27日

11月14日、15日、16日 11月21日、22日

01月23日、24日、25日 01月30日、31日、02月01日

実験の流れ 　項目の数字は 第3章、第4章 の目次参照

実験日が週3日の場合

1日目

3-2-1 毛髪の準備とDNAの抽出

3-2-2 PCR（Polymerase Chain Reaction）反応　【参考：4-1. ピペットマンの使い方】

2日目

3-2-3 PCR 反応産物の検出　【参考：4-2. アガロースゲル電気泳動法】

3-2-4 DNA断片（PCR反応産物[Mismatch]）の精製　【参考：4-3. PCR増幅断片の精製】

3日目

3-2-5 制限酵素によるDNA断片（PCR反応産物）の切断（反応中にアガロースゲル作成）

3-2-6 制限酵素反応によるDNA切断有無の検出　【参考：4-2. アガロースゲル電気泳動法】

3-2-7 エタノールパッチテスト

3-2-8 遺伝子型の推定

実験日が週2日の場合（3-2-3を省略）

1日目

3-2-1 毛髪の準備とDNAの抽出

3-2-2 PCR（Polymerase Chain Reaction）反応　【参考：4-1. ピペットマンの使い方】

3-2-7 エタノールパッチテスト

2日目

3-2-4 DNA断片（PCR反応産物）の精製　【参考：4-3. PCR増幅断片の精製】

3-2-5 制限酵素によるDNA断片（PCR反応産物）の切断（反応中にアガロースゲル作成）

3-2-6 制限酵素反応によるDNA切断有無の検出　【参考：4-2. アガロースゲル電気泳動法】

3-2-8 遺伝子型の推定

第1章　注意事項 　（1-1. は冊子体テキストより詳しい、1-2. 1-3. はほぼ同じ）

1-1. 全般的な注意事項

1-2. レポートの書き方

1-3. 遺伝子実験における個人情報の取り扱いについて

第2章　目的・解説 　（［解説］は冊子体テキストより詳しい）

2-1. 目　的

2-2. 解　説

2-2-1 遺伝子と遺伝情報、遺伝子診断

2-2-2 PCR（Polymerase Chain Reaction）法

2-2-3 ヒトにおけるアルコール代謝

2-2-4 本実験の戦略

第3章　実験方法 　（冊子体テキストよりかなり詳しい。テキストと番号が異なる）

3-1. 準備・試薬

3-1-1 試薬類

3-1-2 器具類

3-2. 方　法

3-2-1 毛髪の準備とDNAの抽出

3-2-2 PCR（Polymerase Chain Reaction）反応

3-2-3 PCR 反応産物の検出

3-2-4 DNA断片（PCR反応産物[Mismatch]）の精製

3-2-5 制限酵素によるDNA断片（PCR反応産物）の切断

3-2-6 制限酵素反応によるDNA切断有無の検出

3-2-7 エタノールパッチテスト

3-2-8 遺伝子型の推定

第4章　機器類の使い方 　（冊子体テキストより詳しい）

4-1. ピペットマンの使い方

4-2. アガロースゲル電気泳動法

4-3. PCR増幅断片の精製

第5章　参考・課題 　（冊子体テキストにない解説がかなりある）

5-1. 参　考

5-2. 課　題

第6章　おまけ・参考 　（冊子体テキストにはない；解説に使った図など）

6-1. 解説のための図

6-2. 解説のための高校生向けの解説より転用の図

無断転載を禁じます (芦田嘉之)